Влияние препарата на основе хлорина е₆ на агрегационную активность тромбоцитов

Цель исследования – изучение влияния радахлорина на агрегационную активность тромбоцитов в опытах in vitro и ex vivo. Опыты проведены на крысах-самцах линии Wistar. Агрегационную активность тромбоцитов определяли в плазме, обогащенной тромбоцитами (PRP), турбидиметрическим методом, индуктор агрегации – аденозиндифосфат (АДФ) в конечной концентрации 1,25 μМ. Пробы PRP, содержащие радахлорин, облучали при плотности мощности 0,05 Вт/см². После темновой инкубации в течение 5 мин PRP с радахлорином наблюдали дозозависимое угнетение агрегации тромбоцитов. Лазерное облучение (плотность энергии 12,5 Дж/см² и 25 Дж/см²) усиливало ингибирующее влияние радахлорина. Через 3 ч после внутривенного введения фотосенсибилизатора скорость и интенсивность агрегации тромбоцитов не изменялись, а дезагрегация значимо замедлялась. Облучение при плотности энергии 5 Дж/см² не повлияло на кинетику агрегации тромбоцитов, при 10 Дж/см² –дезагреция еще больше замедлялась, а при 20 Дж/см² – уменьшались скорость и интенсивность агрегации тромбоцитов, а дезагрегации не происходило.

В условиях in vitro радахлорин дозозависимо ингибирует АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов крыс; после лазерного облучения этот эффект значимо усиливается. Воздействие радахлорина на циркулирующие тромбоцитов приводит к изменению их функционального состояния, что проявляется в замедлении дезагрегации после воздействия АДФ. После лазерного облучения (10–20 Дж/см²) выраженность функциональных изменений увеличивается. Обсуждается вопрос о роли снижения дезагрегационной активности тромбоцитов в механизме тромбоза сосудов в зоне воздействия при фотодинамической терапии.

1. Senge M.O., Radomski M.W. Platelets, photosensitizers, and PDT // Photodiagnosis and Photodynamic Therapy. – 2013. – Vol. 10. – P. 1–16.

2. Chuannong Z. Mechanisms of tumor necrosis induced by photodynamic therapy // Journal of Photochemistry and Photobiology. B: Biology. – 1989. – No. 3. – P. 299–318.

3. Zieve P.D., Solomon H.M., Krevans J.R. The effect of hematoporphyrin and light on human platelets. I: Morphologic, functional, and biochemical changes // J. Cell. Physiol. – 1966. – Vol. 67. – Р. 271–279. Doi:10.1002/jcp.1040670207.

4. Solomon H.M., Zieve P.D., Krevans J.R. The effect of hematoporphyrin and light on human platelets. II: Uptake of hematoporphyrin // J. Cell. Physiol. – 1966. – Vol. 67, No. 2. – Р. 281–284. 5. Zieve P.D., Solomon H.M. The effect of hematoporphyrin and light on human platelets. III: Release of potassium and acid phosphatase // J. Cell. Physiol. – 1966. – Vol. 68. – Р. 109–111. Doi: 10.1002/jcp.1040680204.

5. Самаль А.Б., Зорина Т.Е., Черенкевич С.Н. Сенсибилизированное хлорином е 6 фотоингибирование агрегации тромбоцитов: участие активных форм кислорода // Гематол. и трансфузиол. – 1991. – Т. 36, № 4. – С. 19–21.

6. Самаль А.Б., Зорина Т.Е., Веселко Н.И. Фотосенсибилизированное хлорином е 6 ингибирование агрегации тромбоцитов человека // Фармакол. и токсикол. – 1991. – Т. 54, № 1. – С. 32–34.

7. Hendersen B.W. Wieman T.J., Haydon P.S. The effects of thrombocytopenia on vessel stasis and macromolecular leakage therapy using photofrin // Photochem Photobiol. – 1997. – Vol. 66. – P. 513–517.

8. Зорина Т.Н., Далидович А.А., Марченко Л.Н. Механизмы фотодинамической терапии неоваскулярных заболеваний глазного дна // Материалы науч.-практ. конф. / под ред. С. М. Смотрина [и др.]. – Гродно: ГрГМУ, 2011. – С. 27–30.

9. Белозерцева И.В., Драволина О.А., Тур М.М. Руководство по использованию лабораторных животных для научных и учебных целей в ПСПбГМУ им. акад. И. П. Павлова / под ред. Э.Э. Звартау. – СПб.: СПбГМУ, 2014. – 80 с.

10. Privalov V.A., Lappa A.V., Seliverstov O.V. Clinical Trials of a New Chlorin Photosensitizer for Photodynamic Therapy of Malignant Tumors // Proc. SPIE The International Society for Optical Engineering. – 2002. – Р. 4612. Doi: 10.1117/12.469355.

11. Shi H., Liu Q., Qin X. et al. Pharmacokinetic study of a novel sonosensitizer chlorin-e6 and its sonodynamic anti-cancer activity in hepatoma-22 tumor-bearing mice // Biopharm. Drug. Dispos. – 2011. – Vol. 32, № 6. – Р. 319–332. Doi: 10.1002/bdd.761.

12. Shton I.O., Sarnatskaya V.V., Prokopenko I.V. Chlorin e6 combined with albumin nanoparticles as a potential composite photosensitizer for photodynamic therapy of tumors // Exp. Oncol. – 2015. – Vol. 37, № 4. – Р. 250–254. PMID: 26710836.

13. Volovetsky A.B., Sukhov V.S., Balalaeva I.V. et al. Pharmacokinetics of Chlorin e6-Cobalt Bis(Dicarbollide) Conjugate in Balb/c Mice with Engrafted Carcinoma // Int. J. Mol. Sci. – 2017. – Vol. 18, № 12. – Р. 2556. Doi: 10.3390/ijms18122556.

14. Park J.Y., Ji H.D., Jeon B.R. et al. Chlorin e6 prevents ADP-induced platelet aggregation by decreasing PI3K-Akt phosphorylation and promoting cAMP production // Evid Based Complement Alternat Med. – 2013. Doi: 10.1155/2013/569160.

15. Влияние фотосенсибилизатора радахлорина и фотодинамического воздействия на индуцированную коллагеном агрегацию тромбоцитов / Т. Г. Гришачева, И. Н. Дементьева, С. Г. Чефу, Н. Н. Петрищев // Лазер. мед. – 2017. – № 4. – С. 42–46.

16. Maayani S., Tagliente T. M., Schwarz T. et al. Deaggregation is an integral component of the response of platelets to ADP in vitro: kinetic studies of literature and original data // Platelets. – 2001. – № 12 (5). – Р. 279–291. Doi: 10.1080/09537100120071004.

17. Sugidachi A., Asai F., Ogawa T. et al. The in vivo pharmacological profile of CS–747, a novel antiplatelet agent with platelet ADP receptor antagonist properties // British Journ. of Pharmacology. – 2000. – № 129. – Р. 1439–1446. Doi: 10.1038/sj.bjp.0703237.

18. Wang Z., Cai F., Chen X. et al. The Role of Mitochondria-Derived Reactive Oxygen Species in Hyperthermia-Induced Platelet Apoptosis // PLoS ONE. – 2013. – Vol. 8, № 9. – Р. e75044. Doi: 10.1371/journal.pone.0075044.